Diferența cheie - Citometrie de flux față de FACS
În contextul teoriei celulare, celulele sunt unitatea structurală și funcțională de bază a tuturor organismelor vii. Sortarea celulelor este o metodologie care este utilizată pentru a separa diferite celule în funcție de caracteristicile fiziologice și morfologice. Ele pot avea caracteristici intracelulare sau extracelulare. Interacțiunea ADN-ului, ARN-ului și proteinelor sunt considerate proprietăți interactive intracelulare, în timp ce forma, dimensiunea și diferitele proteine de suprafață sunt considerate proprietăți extracelulare. În știința modernă, metodologiile de sortare a celulelor au condus la asistarea diferitelor investigații în studiile biologice și, de asemenea, la stabilirea de noi principii prin cercetări în medicină. Sortarea celulelor se realizează pe diverse metodologii care includ atât primitive cu mai puține echipamente, cât și metodologii tehnologice avansate cu utilizarea de mașini sofisticate. Citometria de flux, sortarea celulelor fluorescente activate (FACS), selecția celulei magnetice și sortarea celulei unice sunt metodologiile majore utilizate. Citometria de flux și FACS sunt dezvoltate pentru a diferenția celulele în funcție de proprietățile lor optice. FACS este un tip specializat de citometrie în flux. Citometria de flux este o metodologie care este utilizată în timpul analizei unei populații eterogene de celule în funcție de diferite molecule de suprafață celulară, dimensiune și volum, care permite investigarea celulelor individuale. FACS este un proces prin care un eșantion de amestec de celule este sortat în funcție de caracteristicile lor de dispersie a luminii și de fluorescență în două sau mai multe recipiente. Aceasta este diferența cheie între citometria în flux și FACS.
CUPRINS
1. Prezentare generală și diferența cheie
2. Ce este citometria de flux
3. Ce este FACS
4. Asemănări între citometria de flux și FACS
5. Comparație side by side - Citometrie de flux vs FACS în formă tabelară
6. Rezumat
Ce este citometria de flux?
Citometria de flux este o metodă care este utilizată pentru a examina și determina expresia moleculelor intracelulare și a suprafeței celulare și pentru a defini și caracteriza tipuri de celule distincte. Este, de asemenea, utilizat pentru determinarea volumului celulei și a dimensiunii celulei și pentru a evalua puritatea subpopulațiilor care sunt izolate. Acest lucru permite evaluarea multiparametrică a celulelor unice aproximativ în același timp. Citometria de flux este utilizată în măsurarea intensității fluorescenței care este produsă datorită anticorpilor marcați fluorescent care ajută la identificarea proteinelor sau liganzilor care se leagă de celulele asociate.
Figura 01: Citometrie de flux
În general, citometria în flux include în principal trei subsisteme. Ele sunt fluidele, electronica și optica. În citometria de flux, sunt disponibile cinci componente principale care sunt utilizate în sortarea celulelor. Acestea sunt, o celulă de flux (un flux de lichid care este utilizat pentru a le transporta și a alinia celulele pentru procesul de detectare optică), un sistem de măsurare (poate fi din diferite sisteme, inclusiv lămpi cu mercur și xenon, răcite cu apă de mare putere sau lasere răcite cu aer de mică putere sau lasere cu diode), un ADC; Sistem analogic la convertor digital, sistem de amplificare și un computer pentru analiză. Achiziția este procesul prin care datele sunt colectate din probe folosind citometru de flux. Acest proces este mediat de un computer care este conectat cu citometrul de flux. Software-ul prezent în computer analizează informațiile furnizate computerului din citometrul de flux. Software-ul are, de asemenea, capacitatea de a regla parametrii experimentului care controlează citometrul de flux.
Ce este FACS?
În contextul citometriei în flux, sortarea celulelor activate prin fluorescență (FACS) este o metodă care este utilizată pentru diferențierea și sortarea unui eșantion dintr-un amestec de celule biologice. Celulele sunt separate de două sau mai multe containere. Metoda de sortare se bazează pe caracteristicile fizice ale celulei, care include caracteristici de dispersie a luminii și fluorescență ale celulei. Aceasta este o tehnică științifică importantă, care poate fi utilizată pentru a obține rezultate fiabile cantitative și calitative ale semnalelor de fluorescență care sunt emise de la fiecare celulă. În timpul FACS, inițial, amestecul pre-obținut de celule; o suspensie este direcționată spre centrul unui curent îngust de lichid care curge rapid. Fluxul de lichid este conceput pentru a separa celulele din suspensie pe baza diametrului fiecărei celule. Un mecanism de vibrație este aplicat fluxului de suspensie care are ca rezultat formarea picăturilor individuale.
Figura 02: FACS
Sistemul este calibrat pentru a crea o singură picătură cu o singură celulă. Chiar înainte de formarea picăturilor, suspensia de curgere se deplasează de-a lungul unui aparat de măsurare a fluorescenței care detectează caracteristica fluorescenței fiecărei celule. În punctul de formare a picăturilor, este plasat un inel de încărcare electrică pe care o sarcină este indusă inelului înainte de măsurarea intensității fluorescenței. Odată ce picăturile sunt formate din fluxul de suspensie, o sarcină este prinsă în picături care apoi intră într-un sistem de deviere electrostatică. Conform taxei, sistemul deviază picăturile în diferite containere. Metoda de aplicare a taxei variază în funcție de diferite sisteme utilizate în FACS. Echipamentul utilizat în FACS este cunoscut ca un sortator de celule activate cu fluorescență.
Care este asemănarea dintre citometria de flux și FACS?
Citometria de flux și FACS sunt dezvoltate pentru a diferenția celulele în funcție de proprietățile lor optice
Care este diferența dintre citometria în flux și FACS?
Difuzarea articolului din mijloc înainte de tabel
Citometrie de flux vs FACS |
|
| Citometria de flux este o metodologie care este utilizată în timpul analizei unei populații eterogene de celule în funcție de diferite molecule de suprafață celulară, dimensiune și volum, care permite investigarea celulelor individuale. | FACS este un proces prin care un eșantion de amestec de celule este sortat în funcție de caracteristicile lor de dispersie a luminii și de fluorescență în două sau mai multe recipiente. |
Rezumat - Citometrie de flux vs FACS
Celula este unitatea structurală și funcțională de bază a tuturor organismelor vii. Sortarea celulelor este procesul prin care celulele sunt izolate și diferențiate în diferite categorii pe baza proprietăților lor intracelulare și extracelulare. Citometria de flux și FACS sunt două metodologii importante în sortarea celulelor. Ambele procese sunt dezvoltate pentru a diferenția celulele în funcție de proprietățile lor optice. Citometria de flux este o metodologie care este utilizată în timpul analizei unei populații eterogene de celule în funcție de diferite molecule de suprafață celulară, dimensiune și volum, care permite investigarea celulelor individuale. FACS este un proces prin care un eșantion de amestec de celule este sortat în funcție de caracteristicile lor de dispersie a luminii și de fluorescență în două sau mai multe recipiente. Aceasta este diferența dintre Citometria de flux și FACS.
Descărcați versiunea PDF a citometriei de flux față de FACS
Puteți descărca versiunea PDF a acestui articol și o puteți folosi în scopuri offline, conform notei de citare. Vă rugăm să descărcați versiunea PDF aici Diferența dintre citometria de flux și FACS
