Diferența cheie - Hibridizare in situ vs imunohistochimie
Diagnosticul cancerului și al bolilor infecțioase este o tendință populară în care noile tehnici bazate pe proteomică și genomică sunt utilizate în scopul identificării tumorilor sau celulelor infecțioase, a proliferării sale și a locurilor de dezvoltare a celulelor și analiza bazei genetice a celor mai multe boli transmisibile și netransmisibile. Acest lucru va duce la procesarea și proiectarea precisă a medicamentelor și la dezvoltarea unor terapii personalizate pentru boli. Hibridizarea in situ (ISH) și imunohistochimia (IHC) sunt două astfel de tehnici utilizate pe scară largă în biologia cancerului și diferența cheie dintre hibridizarea in situ și imunochimia constă în moleculele utilizate în procedura de analiză. În ISH, sondele de acid nucleic sunt utilizate în analiză în timp ce, în IHC, anticorpii monoclonali și policlonali sunt utilizați pentru determinările de diagnostic.
CUPRINS
1. Prezentare generală și diferența cheie
2. Ce este hibridizarea in situ
3. Ce este imunohistochimia
4. Asemănări între hibridizarea in situ și imunohistochimia
5. Comparație alăturată - Hibridizare in situ vs imunohistochimie în formă tabelară
6. Rezumat
Ce este hibridizarea in situ (ISH)?
Hibridizarea in situ este o tehnică de hibridizare a acidului nucleic care se realizează direct pe o porțiune sau secțiune de țesut, în întregul țesut sau în celule. Tehnica depinde de teoria asocierii complementare a bazelor Watson Crick, rezultând fie hibrizi ADN-ADN, fie hibrizi ADN-ARN care pot detecta gene mutante sau identifica gena necesară de interes. Secvențe de ADN monocatenar, secvențe de ADN dublu catenar, secvențe de ARN monocatenar sau secvențe sintetice de oligonucleotide sunt utilizate ca sonde în timpul tehnicii de hibridizare, iar aceste sonde sunt etichetate cu un fosfor radioactiv la capătul său 5 'pentru proceduri de identificare la autoradiografie sau etichetate folosind coloranți fluorescenți. Există diferite tipuri de tehnici ISH disponibile pe baza tipului de sondă utilizat și a tipului de tehnică de vizualizare urmată.
Figura 01: Hibridizare fluorescentă in situ
Există multe aplicații ale ISH, în principal în diagnosticul molecular al bolilor infecțioase, pentru a identifica prezența agenților patogeni și pentru a confirma agentul patogen prin diagnostic molecular. Este, de asemenea, utilizat în domeniile biologiei dezvoltării, cariotipării și analizei filogenetice și cartării fizice a cromozomilor.
Ce este imunohistochimia (IHC)?
În tehnica IHC, molecula principală analizată este antigenul. În timpul IHC, anticorpii monoclonali și policlonali sunt utilizați pentru a determina prezența antigenilor la infecție sau la starea de proliferare celulară malignă. Tehnica se bazează pe legarea antigen-anticorp, iar etichetele enzimei sunt utilizate pentru această tehnică; o astfel de aplicație este ELISA (testul imunosorbent legat de enzime). Markerii pot fi, de asemenea, anticorpi cu etichetă fluorescentă sau anticorpi marcați radio.
Figura 02: Imunohistochimie
IHC este utilizat pe scară largă pentru detectarea celulelor canceroase. Procedurile de diagnostic vizează antigenii prezenți pe celulele tumorale pentru a identifica și caracteriza tumora. Aceeași procedură este încorporată pentru diagnosticarea agenților infecțioși. Anticorpii monoclonali și policlonali sunt, de asemenea, utilizați pentru a analiza diferite produse genetice, permițând reacția de legare anticorp-antigen între proteina dorită și anticorpul sintetic administrat.
Care sunt asemănările dintre hibridizarea in situ și imunohistochimia?
- ISH și IHC sunt reacții foarte specifice.
- Ambele tehnici sunt extrem de precise.
- Ambele tehnici pot fi utilizate în diagnosticarea cancerului și a bolilor infecțioase.
- Aceste tehnici sunt efectuate în medii sterile in vitro.
- Ambele sunt tehnici rapide care oferă rezultate reproductibile.
- ISH și IHC folosesc metode de detectare, cum ar fi etichetarea radio și tehnicile de fluorescență.
Care este diferența dintre hibridizarea in situ și imunohistochimia?
Difuzarea articolului din mijloc înainte de tabel
Hibridizare in situ vs imunohistochimie |
|
| ISH este o tehnică de hibridizare a acidului nucleic care se realizează direct pe o porțiune sau secțiune de țesut sau întregul țesut. | IHC este o tehnică în care anticorpii monoclonali și policlonali sunt utilizați pentru a determina prezența antigenilor, care sunt markeri speciali ai proteinelor plasate pe suprafețele celulare. |
| Tipul de molecule bio analizate | |
| ISH analizează acizii nucleici. | IHC analizează proteinele-antigene. |
| Baza reacției biochimice | |
| Împerecherea complementară a bazelor între ADN-ADN sau ADN-ARN apare în această tehnică. | Interacțiunile antigen-anticorp sunt implicate în imunohistochimie. |
| Metode de detectare legate de enzime | |
| Metodele de detectare legate de enzime nu pot fi utilizate în ISH. | Metodele de detectare legate de enzime pot fi utilizate în IHC. |
Rezumat - Hibridizare in situ vs imunohistochimie
Diagnosticul molecular este o metodă rapidă și de confirmare care poate fi utilizată pentru a identifica o boală netransmisibilă, cum ar fi cancerul sau bolile transmisibile, cum ar fi HIV sau tuberculoza, pe baza markerilor moleculari prezenți pe celulele care duc la manifestarea bolii. Markerii moleculari pot fi prezenți sub formă de proteine exprimate sau la nivel genetic pe baza căruia sunt introduse diferite tehnici noi pentru a crește eficiența și sunt mai puțin laborioase, deși există un cost ridicat implicat în aceste tehnici. Astfel, ISH depinde de formarea hibrid ADN-ADN sau ADN-ARN, iar IHC depinde de reacțiile specifice dintre anticorp și antigen. Aceasta este diferența dintre hibridizarea in situ.
Descărcați versiunea PDF a hibridizării in situ vs imunohistochimie
Puteți descărca versiunea PDF a acestui articol și o puteți folosi în scopuri offline, conform notei de citare. Vă rugăm să descărcați versiunea PDF aici Diferența dintre hibridizarea in situ și imunohistochimia.
