Diferența cheie - YAC vs M13 Phage Vector
Clonarea ADN-ului este un proces important care permite propagarea unor fragmente importante de ADN ale organismelor. Este nevoie de unirea ADN-ului specific cu ADN-ul vector pentru a crea ADN recombinant care se transformă în organismul gazdă. Un vector este o moleculă de ADN care se comportă ca un vehicul pentru a transporta material genetic străin într-o altă celulă sau organism. Ar trebui să fie capabil să se replice în interiorul organismului gazdă și să producă mai multe copii ale ADN-ului recombinant. Există diferite tipuri de vectori utilizați în clonarea ADN-ului. Cromozomul artificial de drojdie (YAC) și vectorul de fag M13 sunt două tipuri printre ele. Diferența cheie între vectorul de fag YAC și M13 este că YAC este un cromozom artificial care se reproduce în celulele de drojdie în timp ce vectorul de fag M13 este un ADN circular monocatenar al bacteriofagului M13 care se reproduce în celulele E Coli.
CUPRINS
1. Prezentare generală și diferența cheie
2. Ce este YAC
3. Ce este vectorul fagului M13
4. Comparație side by side - YAC vs Vectorul fagului M13
5. Rezumat
Ce este un vector YAC?
YAC este un cromozom construit artificial, care are capacitatea de a transporta un segment mare de ADN străin și de a se replica în celulele de drojdie. Are secvențe centromere, telomere și replicare autonomă esențiale pentru replicare și stabilitate. YAC ar trebui să poarte, de asemenea, un marker selectiv sau markeri și site-uri de restricție pentru a face din acesta un vector de clonare eficient. Secvențe mari cuprinse între 1000 kb și 2000 kb pot fi inserate în YAC și transferate în drojdie.
Figura 01: Vector YAC
Ce este Vectorul de fag M13?
Bacteriofagul M13 este un virus care infectează și se reproduce în E Coli. Genomul bacteriofagului M13 este de dimensiuni mici, aproximativ 6,7 kb. Este un ADN monocatenar, circular și pozitiv. Acest virus infectează în mod specific bacteriile E Coli prin F pilus. Odată ce intră în ADNs în bacterie, își sintetizează catena complementară și devine dsADN sau forma replicativă (RF) a M13. RF se poate comporta ca o plasmidă în organismul gazdă. DsDNA se replică în E Coli și produce ssDNA care poartă fagi noi. Acești fagi noi sunt eliberați continuu din E Coli fără a ucide celula gazdă. Cu toate acestea, infecția încetinește creșterea E Coli. dsADN poate fi extras din celule bacteriene și utilizat ca vectori în clonarea ADN-ului. Sunt cunoscuți sub numele de vectori de fagi M13. Ele pot fi ușor manipulate și utilizate în mod similar cu vectorii plasmidici.
Capacitatea inerentă de infecție a acestor fagi M13 servește ca o bună calificare pentru a fi utilizată ca vector în clonarea genelor. Când se dezvoltă M13 într-un vector, mai multe elemente ar trebui încorporate în genomul său. Acestea sunt, o genă pentru proteina lac represor (lac I), regiunea operator-proximală a genei lac Z, un promotor lac și un situs de clonare multiplă (polilinker). Când ADNm al M13 este utilizat ca vectori, poate fi tratat ca un vector plasmid. Cu toate acestea, utilizarea ssDNA M13 are avantaje în secvențierea ADN-ului și mutageneza direcționată către situs.
Deoarece vectorul fagului M13 poartă mai multe situri de clonare în regiunea lacZ, vectorii recombinați pot fi identificați cu ușurință prin screeningul coloniilor albastre / albe pe plăcile de agar care conțin IPTG și X-Gal. Plăcile albastre produse pe plăci nu conțin fagii recombinați. Prin urmare, fagii cu inserții pot fi selectați în scopul clonării.
Figura 02: Bacteriofagul M13
Care este diferența dintre YAC și M13 Phage Vector?
Difuzarea articolului din mijloc înainte de tabel
YAC vs M13 Phage Vector |
|
| YAC este un cromozom modificat genetic care are capacitatea de a transporta un segment mare de ADN străin și de a se replica în celulele de drojdie. | Vectorul fagic M13 este un vector viral dezvoltat de bacteriofagul M13 care este utilizat pentru a insera ADN străin în E Coli. |
| Scop | |
| YAC-urile au fost concepute pentru a clona fragmente mari de ADN genomic în drojdie. | Vectorii de fagi M13 sunt utilizați pentru a insera ADN străin în E Coli. |
| Introduceți lungimea | |
| YAC-urile pot conține inserții genomice de dimensiune megabază (1000 kb - 2000 kb). | Dimensiunea inserțiilor este de aproximativ 1.500 bps. |
| Constructie | |
| ADN-ul YAC este dificil de purificat intact și necesită o concentrație mare pentru generarea sistemului vector YAC. | Apare prin intermediul lanțului de electroni fotosintetic ciclic. |
| Stabilitate | |
| YAC este instabil. | Fagii M13 pot fi extrși cu ușurință. |
| mărimea | |
| Enzimele sunt molecule mai mari. | Fagii M13 sunt stabili decât YAC. |
Rezumat - YAC vs M13 Phage Vector
YAC este un sistem vector construit artificial care folosește o regiune specifică a cromozomului de drojdie pentru a insera segmente mari de material genetic în celulele de drojdie. Vectorul fagic M13 este un sistem vectorial derivat din bacteriofagul M 13 care folosește E coli ca organism gazdă. Aceasta este principala diferență dintre YAC și M13 Phage Vector. Ambele sunt la fel de utile în tehnologia ADN-ului recombinant și clonarea genelor.
