Diferența cheie - Nitroceluloză vs membrană de nailon
Blotarea este o tehnică importantă pentru detectarea secvențelor specifice de ADN, ARN și proteine din amestecurile lor din biologia moleculară. Se face folosind o membrană numită blot. Există diferite tehnici de ștergere, cum ar fi nordul, sudul și vestul. Selectarea unei membrane adecvate pentru procesul de ștergere trebuie făcută cu atenție pentru a preveni legarea nespecifică și detectările greșite. Nitroceluloză, nylonul și PVDF sunt membrane utilizate în mod obișnuit în tehnicile de ștergere. Au caracteristici diferite. Diferența cheie între nitroceluloză și membrana de nailon este că membranele de nitroceluloză au un potențial ridicat de imobilizare a proteinelor, în timp ce membranele de nailon au un potențial ridicat de imobilizare a acidului nucleic. Cu toate acestea, ambele tipuri de membrane sunt utilizate frecvent în tehnicile de blotare.
CUPRINS
1. Prezentare generală și diferența cheie
2. Ce este o membrană de nitroceluloză
3. Ce este o membrană de nylon
4. Comparație alăturată -Nitroceluloză vs membrană de nylon
5. Rezumat
Ce este o membrană de nitroceluloză?
Membrana nitrocelulozică este un filtru de membrană utilizat în mod obișnuit în tehnicile de acid nucleic și de ștergere a proteinelor. Are un potențial ridicat de legare a proteinelor. Prin urmare, membranele nitrocelulozice sunt utilizate pe scară largă în tehnica western blot. Membranele de nitroceluloză sunt compatibile cu toate tehnicile de hibridizare și prezintă capacități de legare superioare fără interferențe. Membranele nitrocelulozice sunt în mod natural de natură hidrofilă. Acestea fac interacțiune hidrofilă cu molecule și le imobilizează eficient pe membrană. Membranele comerciale de nitroceluloză sunt disponibile în două dimensiuni ale porilor: 0,45 și 0,2 µm.
Figura 01: Membrană de nitroceluloză utilizată în Western Blot
Ce este o membrană din nailon?
Membrana din nailon este un alt tip de membrană comercială utilizată în tehnicile de ștergere. Este alternativ utilizat cu membranele de nitroceluloză pentru sudarea și sudarea nordului. Membranele din nailon sunt ideale pentru blotarea sudică decât nitroceluloză datorită afinității lor ridicate de legare cu ADN. Datorită mai multor caracteristici unice ale membranelor de nailon, cercetătorii folosesc în mod obișnuit membrane de nailon pentru sudarea și nordul ștergerii în loc de membranele de nitroceluloză. Membranele din nailon sunt, de asemenea, recomandate pentru dezizolare și reprobare, spre deosebire de nitroceluloză.
Figura 02: Membrană de nylon utilizată pentru ștergerea sudică
Care este diferența dintre nitroceluloză și membrană din nailon?
Difuzarea articolului din mijloc înainte de tabel
Nitroceluloză vs membrană din nailon |
|
| Membranele nitrocelulozice sunt fragile. | Membranele din nailon sunt mai puțin fragile. |
| Manipularea | |
| Sunt greu de manevrat. | Sunt ușor de manevrat. |
| Reprobare | |
| Membranele nitrocelulozice neacceptate sunt greu de reprobat. | Reprobarea este ușoară cu membranele din nailon. |
| Compatibilitate cu diferite condiții de depozitare | |
| Membranele de nitroceluloză au o rezistență mai mică pentru a rezista diferitelor condiții de depozitare. | Membranele din nailon răspund mai robust la diferite condiții de depozitare. |
| Utilizare | |
| Este necesară preumectarea. | Preumectarea nu este necesară pentru membranele din nailon. |
| Natura hidrofilă | |
| Membranele nitrocelulozice sunt de natură hidrofilă, dar sunt mai puțin hidrofile decât membranele din nailon. | Au o natură extrem de hidrofilă. |
| Potențial de imobilizare | |
| Membranele nitrocelulozice au o afinitate mai mică pentru acizii nucleici. Dar are o afinitate mare pentru proteine. | Membranele din nailon au un potențial mare de legare cu acizii nucleici decât membranele nitrocelulozice. |
Rezumat - Nitroceluloză vs membrană de nailon
Membranele de nitroceluloză și nailon sunt foi speciale utilizate în tehnica de ștergere pentru a reproduce modelul de bandaj pe gel. Acestea permit posibilitatea de a detecta o secvență specifică sau o proteină din amestecuri prin imobilizarea acestora pe membrană. Odată ce moleculele au fost imobilizate pe membrană, aceasta poate fi utilizată ca substrat pentru analiza hibridizării cu sonde marcate. Membrana de nitroceluloză este utilizată în mod obișnuit pentru detectarea proteinelor în tehnica western blot datorită afinității sale mari de legare cu proteinele. Membranele din nailon sunt adesea folosite pentru ștergerea sudică și nordică. Aceasta este diferența dintre nitroceluloză și membrana de nailon.
