Diferența cheie - Electroforeză pe orizontală și verticală pe gel
Electroforeza pe gel este o tehnică de laborator utilizată în genetică pentru a separa amestecurile care conțin ADN, ARN și alte proteine în funcție de sarcina și mărimea moleculară a acestora. ADN-ul, ARN-ul sau proteinele care trebuie separate prin această metodă sunt trecute printr-un gel care conține pori mici. Moleculele sunt conduse prin gel de un câmp electric. Moleculele trec prin porii gelului, iar viteza mișcării este invers proporțională cu lungimile lor respective. Prin urmare, moleculele cu dimensiuni moleculare mai mici se vor mișca mai repede decât moleculele cu o greutate moleculară mai mare. Câmpul electric este generat de diferența de încărcare la cele două capete ale gelului. Un capăt conține o sarcină pozitivă, iar celălalt capăt conține o sarcină negativă. Deoarece moleculele de ADN și ARN sunt încărcate negativ,vor fi atrași spre capătul încărcat pozitiv al gelului. Electroforeza pe gel poate avea două metode diferite: electroforeza pe gel orizontal și electroforeza pe gel vertical. În electroforeza orizontală pe gel, gelul este prezent într-o orientare orizontală și este scufundat într-un tampon de funcționare continuu, care este prezent în interiorul cutiei de gel. În electroforeza pe gel vertical, sistemul tampon este orientat vertical și este discontinuu cu două camere prezente în partea de sus și în partea inferioară cu un catod și, respectiv, un anod. Aceasta este diferența cheie între electroforeza pe gel orizontală și verticală.gelul este prezent într-o orientare orizontală și este scufundat într-un tampon cu funcționare continuă care este prezent în interiorul cutiei de gel în sine. În electroforeza pe gel vertical, sistemul tampon este orientat vertical și este discontinuu cu două camere prezente în partea superioară și în partea inferioară cu un catod și, respectiv, un anod. Aceasta este diferența cheie între electroforeza pe gel orizontală și verticală.gelul este prezent într-o orientare orizontală și este scufundat într-un tampon cu funcționare continuă care este prezent în interiorul cutiei de gel în sine. În electroforeza pe gel vertical, sistemul tampon este orientat vertical și este discontinuu cu două camere prezente în partea de sus și în partea inferioară cu un catod și, respectiv, un anod. Aceasta este diferența cheie între electroforeza pe orizontală și verticală pe gel.
CUPRINS
1. Prezentare generală și diferența cheie
2. Ce este electroforeza pe gel orizontal
3. Ce este electroforeza pe gel vertical
4. Asemănări între electroforeza pe gel orizontal și vertical
5. Comparație side by side - Electroforeza pe gel orizontal vs vertical sub formă de tabel
6. Rezumat
Ce este electroforeza pe gel orizontal?
Electroforeza pe gel orizontal utilizează teoria de bază pentru separarea moleculelor de ADN, ARN sau proteine în funcție de dimensiunea și sarcina lor moleculară respectivă. În această tehnică, gelul este prezent într-o orientare orizontală și este scufundat într-un tampon care este continuu. Gelul de agaroză este utilizat pentru a separa cutia de gel în două compartimente. Un capăt al cutiei de gel conține un anod, în timp ce celălalt capăt conține un catod. Când se aplică un curent, tamponul utilizat în această tehnică permite crearea unui gradient de încărcare. Când se aplică încărcătura, gelul tinde să se încălzească. Tamponul funcționează și ca agent de răcire, care menține temperatura la niveluri optime. Recircularea tamponului care rulează previne formarea unui gradient de pH. Un sistem tampon discontinuu nu poate fi utilizat în electroforeza orizontală pe gel, deoarece cele două compartimente ale sistemului gelului sunt conectate cu tamponul care rulează. Acrilamida este utilizată în timpul electroforezei pe gel pentru a separa amestecurile de proteine.
Figura 01: Electroforeză pe gel orizontal
În electroforeza orizontală pe gel, acrilamida nu poate fi utilizată deoarece cutia cu gel este expusă la oxigen. Datorită prezenței oxigenului, polimerizarea acrilamidei este inhibată și acest lucru interferează cu formarea gelului. Electroforeza pe gel orizontal este o metodă fără efort care este utilizată în separarea ADN-ului și ARN-ului.
Ce este electroforeza pe gel vertical?
Tehnica de electroforeză pe gel vertical funcționează în conformitate cu teoria primară a electroforezei pe gel, dar este considerată a fi mai complexă decât metoda de electroforeză pe gel orizontală. Această tehnică utilizează un tampon discontinuu. Un catod este situat în camera superioară, iar anodul este situat în camera inferioară. Electrozii prezenți în fiecare compartiment asigură câmpul electric necesar. Un strat subțire de gel este turnat între cele două plăci de sticlă montate. Prin urmare, porțiunea superioară a gelului este scufundată în camera superioară, iar porțiunea inferioară a gelului este scufundată în camera din partea inferioară. Odată ce curentul este aplicat, o mică porțiune a tamponului se mută în camera inferioară din camera superioară prin gel. Curentul aplicat în această tehnică este de unități minute.
Figura 02: Electroforeză pe gel vertical
În electroforeza pe gel vertical, tamponul curge numai prin gel. Acest lucru permite controlul precis al gradientului de tensiune în timpul etapei de separare. Gelul de acrilamidă poate fi utilizat deoarece compartimentele nu sunt expuse la oxigenul atmosferic. Datorită dimensiunii mai mici a porilor gelului de acrilamidă, separarea precisă poate fi realizată cu o rezoluție mai mare.
Care sunt asemănările dintre electroforeza pe orizontală și verticală pe gel?
- Ambele sisteme funcționează în conformitate cu teoria de bază a electroforezei pe gel.
- Anodul și catodul sunt utilizate pentru a furniza câmpul electric necesar în ambele sisteme.
Care este diferența dintre electroforeza pe gel orizontală și verticală?
Difuzarea articolului din mijloc înainte de tabel
Electroforeză pe orizontală și pe verticală pe gel |
|
| Electroforeza pe gel orizontal este o tehnică de electroforeză pe gel în care gelul este prezent într-o orientare orizontală. | Electroforeza pe gel vertical este o tehnică de electroforeză pe gel în care gelul este orientat vertical. |
| Tampon | |
| Electroforeza pe gel orizontal constă dintr-un tampon continuu. | Tamponul de rulare este discontinuu în electroforeza pe gel vertical. |
| Utilizarea acrilamidei | |
| Acrilamida nu poate fi utilizată pentru electroforeza orizontală pe gel, deoarece cutia cu gel este expusă la oxigenul atmosferic. | Deoarece gelul nu este expus la oxigenul atmosferic datorită a două camere separate, acrilamida ar putea fi utilizată pentru electroforeza pe gel vertical. |
| Funcţie | |
| Electroforeza pe gel orizontal este mai des utilizată pentru separarea amestecurilor de ADN și ARN, dar nu și a proteinelor. | Electroforeza pe gel vertical este utilizată pentru a separa amestecurile de proteine. |
Rezumat - Electroforeză pe orizontală vs verticală pe gel
Electroforeza pe gel este o tehnică de laborator care este utilizată pe scară largă în separarea amestecurilor care conțin molecule de ADN, ARN și proteine. Există două metode de electroforeză pe gel: electroforeză pe orizontală și verticală pe gel. În electroforeza pe gel orizontal, tamponul de rulare este continuu, în timp ce în electroforeza pe gel vertical, este discontinuu. Aceasta este diferența dintre electroforeza pe gel orizontală și verticală. Ambele sisteme funcționează conform principiului comun al electroforezei pe gel.
Descărcați versiunea PDF a electroforezei orizontale vs verticale pe gel
Puteți descărca versiunea PDF a acestui articol și o puteți folosi în scopuri offline, conform notei de citare. Vă rugăm să descărcați versiunea PDF aici Diferența dintre electroforeza pe gel orizontală și verticală.
