Diferența cheie - imunofluorescență vs imunohistochimie
Diagnosticul bolilor, care utilizează metode biologice moleculare, a devenit o zonă emergentă a tehnologiei clinice de laborator. Include toate testele și metodele pentru identificarea unei boli și înțelegerea cauzei unei boli prin analiza ADN-ului, ARN-ului sau proteinelor exprimate într-un organism. Progresele rapide în diagnosticul molecular au permis cercetarea de bază privind bolile transmisibile și netransmisibile. Acestea sunt utilizate pentru a determina modificările secvenței sau a nivelurilor de expresie în gene sau proteine cruciale implicate în boală. Imunofluorescența (IF) și imunohistochimia (IHC) sunt două astfel de tehnici utilizate pe scară largă în biologia cancerului. IF este un tip de IHC în care se folosește o metodă de detectare a fluorescenței pentru a analiza anticorpii monoclonali și policlonali, în timp ce IHC utilizează metode bazate pe substanțe chimice pentru a detecta anticorpii monoclonali și policlonali. Aceasta este diferența cheie între IF și IHC.
CUPRINS
1. Prezentare generală și diferența cheie
2. Ce este imunofluorescența
3. Ce este imunohistochimia
4. Asemănări între imunofluorescență și imunohistochimie
5. Comparație side by side - Imunofluorescență vs imunohistochimie în formă tabelară
6. Rezumat
Ce este imunofluorescența (IF)?
Imunofluorescența este o tehnică de detectare în care anticorpii utilizați în test sunt etichetați folosind coloranți fluorescenți sau proteine fluorescente în scopul detectării. Anticorpii secundari etichetați pot duce la semnale nedorite de fundal; prin urmare, tehnica IF se bazează pe marcarea anticorpului primar în sine în prezent pentru a evita semnalele nedorite în timpul detectării. Prin această tehnică, se previne legarea nespecifică între anticorpul primar și cel secundar și este mai rapidă, deoarece nu există o etapă de incubație secundară implicată. Calitatea datelor este, de asemenea, îmbunătățită.
Figura 01: Colorare imunofluorescentă dublă pentru BrdU, NeuN și GFAP
Fluorocromii sau coloranții fluorescenți sunt compuși care pot absorbi radiațiile, de preferință radiațiile ultraviolete care sunt excitate. Când particulele ajung la starea fundamentală din starea excitată, ele emit radiații care sunt captate și detectate de un detector pentru a forma un spectru. Este de o mare importanță ca eticheta fluorescentă să fie compatibilă și stabilă pentru reacția specială și să fie conjugată corespunzător cu anticorpul pentru a obține rezultate exacte. Unul dintre cei mai utilizați fluorocromi este izotiocianatul de fluoresceină (FITC), care are culoarea verde, cu lungimi de undă maxime de absorbție și emisie de 490 nm și respectiv 520 nm. Rodamina, un alt agent utilizat în IF, are culoarea roșie și are lungimi de undă de absorbție și emisie distincte de 553 nm și 627 nm.
Ce este imunohistochimia (IHC)?
IHC este o metodă de testare moleculară practicată pentru a identifica și confirma prezența antigenului în celula țintă. Celula țintă ar putea fi o particulă infecțioasă, un agent patogen microbian sau o celulă tumorală malignă. IHC utilizează anticorpi monoclonali și policlonali pentru a determina prezența antigenilor prezenți pe suprafața celulară a celulelor țintă. Tehnica se bazează pe legarea antigen-anticorp. Un marker de detecție este conjugat cu acești anticorpi pentru a detecta prezența sau absența antigenului particular. Acești markeri pot fi markeri chimici, cum ar fi enzimele, anticorpii marcați fluorescent sau anticorpii marcați radio.
Figura 02: Felie șoarec-creier colorată de imunohistochimie
Cea mai populară aplicație a IHC este în biologia celulelor canceroase pentru a identifica prezența tumorilor maligne, dar este utilizată și pentru detectarea bolilor infecțioase.
Care sunt asemănările dintre imunofluorescență și imunohistochimie?
- Imunofluorescența și imunohistochimia au loc în condiții in vitro.
- Ambele tehnici se bazează pe antigen-anticorp
- Ambele sunt tehnici foarte rapide.
- Rezultatele tehnicilor sunt reproductibile.
- Ambele au îmbunătățit calitatea datelor.
- Aceste tehnici utilizate în diagnosticarea cancerului și a bolilor infecțioase.
Care este diferența dintre imunofluorescență și imunohistochimie?
Difuzarea articolului din mijloc înainte de tabel
Imunofluorescență vs imunohistochimie |
|
| IF este o tehnică de detectare în care anticorpii utilizați în test sunt etichetați folosind coloranți fluorescenți sau proteine fluorescente pentru detectare. | IHC este o tehnică de detectare în care anticorpii utilizați în test sunt etichetați folosind substanțe chimice sau elemente radioactive pentru detectare. |
| Precizie | |
| Precizia este mai mare în tehnica IF comparativ cu IHC. | Precizia este mai mică în IHC. |
| Specificitate | |
| IF este mai specific. | IHC este mai puțin specific. |
Rezumat - Imunofluorescență vs imunohistochimie
Mecanismele moleculare au adus numeroase schimbări în domeniul medicinei, dând naștere unor metode avansate de testare moleculară care au adus revoluții în domeniul diagnosticului. Aceste invenții au condus la o identificare și confirmare rapidă și precisă a bolii, permițând astfel administrarea și producerea cu succes a medicamentelor. Aceste tehnici sunt, de asemenea, utilizate în farmacologie pentru a găsi țintele medicamentelor și pentru a confirma proprietățile farmacocinetice ale medicamentului în timpul metabolismului medicamentului. IF și IHC sunt două metode de diagnostic care se bazează pe conceptul de legare la antigen și anticorp, deși modul de detectare în ambele tehnici diferă. IF folosește principiul fluorescenței pentru a detecta antigenul și IHC folosește conceptul de conjugare chimică pentru a detecta antigenul. Aceasta este diferența dintre IF și IHC.
Descărcați versiunea PDF a imunofluorescenței vs imunohistochimie
Puteți descărca versiunea PDF a acestui articol și o puteți folosi în scopuri offline, conform notei de citare. Vă rugăm să descărcați versiunea PDF aici Diferența dintre imunofluorescență și imunohistochimie.
