Diferența cheie - Gram Stain vs Culture
Colorarea Gram este o tehnică de colorare care se efectuează pentru a diferenția bacteriile în două grupe în funcție de grosimea stratului de peptidoglican din peretele lor celular. Cultura este o metodă de creștere și menținere a microorganismelor în condiții de laborator pentru analize diferite. Diferența cheie între pata de grame și cultură este funcția lor; tulpina de gram o tehnică de colorare a bacteriilor în care cultura este o metodă de creștere și întreținere a microorganismelor.
CUPRINS
1. Prezentare generală și diferența cheie
2. Ce este Gram Stain
3. Ce este Cultura
4. Comparare Side by Side - Gram Stain vs Culture
5. Rezumat
Ce este Gram Stain?
Colorarea Gram este o tehnică importantă de colorare diferențială utilizată pentru identificarea bacteriilor în Microbiologie. Această tehnică a fost introdusă de bacteriologul danez Hans Christian Gram în 1884. Colorarea Gram clasifică bacteriile în două grupe majore: gram pozitive și gram negative; acestea sunt foarte importante în clasificarea și identificarea bacteriilor. Colorarea Gram se efectuează ca o etapă inițială pentru caracterizarea bacteriană.
Bacteriile sunt grupate pe baza diferențelor din peretele lor celular. Bacteriile Gram pozitive conțin un strat gros de peptidoglican în peretele lor celular, în timp ce bacteriile Gram negative conțin un strat subțire de peptidoglican în peretele celular, așa cum se arată în figura 01. Rezultatul colorării gramului se va baza pe diferența de grosime a stratului de peptidoglican. perete celular.
Figura 1: bacterii Gram pozitive și bacterii Gram negative
Colorarea în grame se realizează folosind patru reactivi diferiți și anume; colorant primar, agent mordant, decolorant și contracolor. Violeta cristalină și safranina servesc drept primele și contracolorate, în timp ce gramele de iod și 95% alcool servesc drept mordant și, respectiv, decolorant.
Pașii de bază ai petei de grame
- Un frotiu bacterian este preparat pe un lamă de sticlă curată, fixat la căldură și răcit.
- Frotiul este inundat cu cristal violet timp de 1-2 minute.
- Frotiul este clătit cu apă curentă de la robinet, pentru a îndepărta petele în exces.
- Gramele de iod se aplică pe frotiu timp de 1 minut.
- Frotiul este clătit cu apă curentă de la robinet
- Frotiul se spală cu alcool 95% timp de 2 - 5 secunde și se clătește cu apă curentă lentă.
- Frotiul este contracolorat cu safranină timp de 1 minut
- Frotiul este clătit cu apă curentă de la robinet, uscat și observat la microscop.
La sfârșitul petei gram, bacteriile gram negative vor fi observate în culoarea roz, în timp ce bacteriile gram pozitive vor fi observate în culoarea purpurie, așa cum se arată în Figura 02. Rezultatul petei gram este decis de grosimea stratului de peptidoglican în peretele lor celular. În timpul etapei de decolorare, pata primară și mordantul sunt ușor îndepărtate din bacteriile gram negative și devin incolore, deoarece au un strat subțire de peptidoglican. Pata primară este reținută în bacteriile grame pozitive, deoarece acestea au un strat gros de peptidoglican. Contra pata nu va fi eficientă pentru bacteriile cu grame pozitive datorită reținerii petei primare. Deci, bacteriile cu grame pozitive vor fi vizibile în culoarea primară a petei, adică în culoarea violet. Pata de contracolor va pata bacteriile gram negative și va fi vizibilă în culoarea pick, care este culoarea safraninei. Prin urmare, este ușor să clasificați bacteriile în două grupe după pata de gram și este valoroasă în diferențierea și identificarea bacteriilor.
Figura 2: Tulpina Gram
Ce este Cultura?
Cultura microbiană este o metodă de cultivare și menținere a microorganismelor în condiții de laborator în diferite scopuri. Culturile sunt cultivate în medii solide, semisolide și lichide, în funcție de tipul și scopul cultivării microorganismelor. Culturile sunt prevăzute cu nutrienții necesari și condițiile de creștere cerute de microorganisme. Există diferite componente ale unui mediu de cultură, cum ar fi sursa de energie, sursa de carbon, sursa de azot, minerale, micronutrienți, apă, agent de solidificare etc. Temperatura optimă, oxigenul și pH-ul ar trebui ajustate în funcție de tipul microorganismului cultivat.
Există diferite tipuri de culturi microbiene; de exemplu, cultură discontinuă, cultură continuă, cultură înțepată, cultură de plăci de agar, cultură de bulion etc. Conform compoziției mediului de creștere, există diferite tipuri de medii de cultură cunoscute sub numele de medii sintetice, medii semisintetice și medii naturale. Culturile microbiene sunt preparate în condiții sterile în interiorul unei camere speciale numite flux de aer laminar. Mediul de creștere și sticlăria sunt sterilizate înainte de inocularea microorganismului dorit. În condiții sterile adecvate, microorganismul țintă este transferat în mediul nutritiv sterilizat și incubat la temperatura optimă. În interiorul mediului, microorganismul va crește și se va înmulți folosind substanțele nutritive furnizate.
Figura 3: O cultură bacteriană pe placă
Care este diferența dintre Gram Stain și Culture?
Difuzarea articolului din mijloc înainte de tabel
Gram Stain vs Culture |
|
Tulpina Gram este o tehnică de colorare diferențială utilizată pentru diferențierea și identificarea bacteriilor. | Cultura microbiană este o metodă de creștere a microorganismului în laborator. |
Componente | |
Acesta folosește reactivi diferiți, inclusiv două pete. | Aceasta folosește diferite medii de cultură, cum ar fi medii solide, semisolide și lichide, compuse din substanțe nutritive și alte condiții necesare. |
Funcții de bază | |
Acest lucru permite gruparea bacteriilor în două grupe: grame negative și grame pozitive. | Acest lucru permite multiplicarea microorganismelor în scopuri diferite. |
Baza | |
Rezultatul colorării Gram se bazează pe diferențele dintre stratul de peptidoglican al peretelui celular. | Microorganismele vor crește și se vor înmulți în mediul de cultură. |
Rezultat | |
Bacteriile gram negative sunt vizibile în culoarea roz, iar bacteriile grame pozitive sunt vizibile în culoarea mov. | Pe plăci, pot fi văzute colonii de microorganisme. Pe mediu lichid, microorganismele sunt sub formă suspendată. |
Rezumat - Gram Stain vs Culture
Culturile microbiene sunt preparate și întreținute în condiții de laborator în diferite scopuri, cum ar fi depozitarea, testarea, purificarea chimică etc. Pata de grame este o procedură de colorare care diferențiază bacteriile în două grupuri principale numite grame bacterii negative și grame bacterii pozitive. Prin urmare, diferența dintre pata de grame și cultură este că pata de grame este o tehnică de colorare a bacteriilor, în timp ce cultura este o metodă de creștere și menținere a microorganismelor în laboratoare.