Diferența cheie - Gram Stain vs Acid Fast
Bacteriile sunt microorganisme foarte mici. Ele sunt transparente, iar detectarea lor este dificilă în condiții de viață și nepătate. Astfel, sunt dezvoltate diferite metode de colorare pentru a facilita detectarea bacteriilor. Există trei tipuri majore de tehnici de colorare: colorare simplă, colorare diferențială și colorare structurală. Colorarea diferențială este o tehnică care folosește mai mult de o pată pentru a diferenția bacteriile. Pata Gram și pata acid-rapidă sunt cunoscute cel mai popular sub numele de pete diferențiale. Colorarea Gram este o tehnică diferențială de colorare, care separă bacteriile în două grupuri cunoscute sub numele de bacterii Gram-pozitive și bacterii Gram-negative. Pata acid-rapidă este o pată diferențială utilizată pentru a identifica organismele rapide la acid, cum ar fi Mycobacterium, de la organisme rapide neacide. Aceasta este diferența cheie între pata Gram și pata Acid Fast.
CUPRINS
1. Prezentare generală și Diferența cheie
2. Ce este colorația Gram
3. Ce este acidorezistență
4. asemănările dintre colorația Gram și acid Fast
5. Side by Side Comparație - colorația Gram vs acidorezistență în tabulare Formular
6. Rezumat
Ce este Gram Stain?
Colorarea Gram este o tehnică importantă de colorare diferențială utilizată pentru identificarea bacteriilor în microbiologie. Această tehnică a fost introdusă de bacteriologul danez Hans Christian Gram în 1884. Colorarea Gram clasifică bacteriile în două grupuri majore numite gram pozitive și gram negative, care sunt foarte importante în clasificarea și identificarea bacteriilor. Microbiologii efectuează colorarea gramului ca etapă inițială în caracterizarea bacteriană în timpul studiilor lor.
Bacteriile sunt grupate pe baza diferențelor din peretele lor celular. Bacteriile gram pozitive sunt compuse dintr-un strat gros de peptidoglican în peretele lor celular, în timp ce bacteriile gram negative sunt compuse dintr-un strat subțire de peptidoglican în peretele lor celular. Rezultatul colorării gramului se va baza pe diferența de grosime a stratului de peptidoglican al peretelui celular.
Colorarea în grame se realizează folosind patru reactivi diferiți și anume; colorant primar, agent mordant, decolorant și contracolor. Cristalul violet și safranina sunt utilizate ca primele și contra pete, în timp ce grame de iod și 95% alcool sunt utilizate ca mordant și, respectiv, decolorant. Etapele de bază ale petei de grame sunt după cum urmează;
- Un frotiu bacterian este preparat pe un lamă de sticlă curată, fixat la căldură și răcit.
- Frotiul este inundat cu cristal violet timp de 1-2 minute.
- Frotiul este clătit cu apă curentă de la robinet, pentru a îndepărta petele în exces.
- Gramele de iod se aplică pe frotiu timp de 1 minut.
- Frotiul este clătit cu apă curentă de la robinet
- Frotiul se spală cu alcool 95% timp de 2 - 5 secunde și se clătește cu apă curentă lentă.
- Frotiul este contracolorat cu safranină timp de 1 minut
- Frotiul este clătit cu apă curentă de la robinet, uscat și observat la microscop.
La sfârșitul petei de gram, bacteriile gram negative vor fi observate în culoarea roz, în timp ce bacteriile gram pozitive vor fi observate în culoarea violet.
Figura 01: bacterii Gram negative și Gram pozitive
Rezultatul petei de grame este decis de grosimea stratului de peptidoglican în peretele celular. În timpul etapei de decolorare, pata primară și mordantul sunt ușor îndepărtate din bacteriile gram negative și devin incolore, deoarece au un strat subțire de peptidoglican. Pata primară este reținută în bacteriile gram pozitive, deoarece acestea au un strat gros de peptidoglican. Contra pata nu va fi eficientă pentru bacteriile gram pozitive datorită reținerii petei primare. Astfel, bacteriile grame pozitive vor fi vizibile în culoarea primară a petei, adică în culoarea violet. Pata de contra va pata bacteriile gram negative și vor fi vizibile în culoarea pick, care este culoarea safraninei. Prin urmare, este ușor să clasificați bacteriile în două grupe în funcție de pata de gram și este valoroasă în diferențierea și identificarea bacteriilor.
Ce este Acid Fast?
Rezistența la acid este o proprietate fizică a anumitor bacterii, în special rezistența lor la decolorare de către acizi în timpul procedurilor de colorare. Odată colorate, aceste organisme rezistă la procedurile de decolorare pe bază de acid diluat sau etanol, obișnuite în multe protocoale de colorare. Astfel, denumirea de „acid rapid” este dată acelor organisme. Această proprietate este prezentată datorită nivelului ridicat de material ceros (acizi micolici) în pereții celulari. Acest test este esențial pentru identificarea Mycobacterium tuberculosis.
Figura 2: Micobacterii rapide cu acid
Această colorare rapidă acidă a fost dezvoltată de Paul Ehrlich în 1882. Tehnica rapidă acidă a lui Ehrlich a fost modificată de Ziehl-Neelsen și este acum utilizată mai frecvent. Procedura de colorare rapidă a acidului implică trei reactivi diferiți. Carbol fuschin este folosit ca pata primară. Alcoolul acid este utilizat ca agent de decolorare. Albastru de metilen este utilizat ca contrapătare. Procedura de colorare se efectuează după cum urmează.
- Pata primară (carbol fuchsin) se aplică pe specimenul fix de pe lamă (Toate celulele vor fi colorate în culoare roșie).
- Diapozitivul este încălzit prin abur timp de 5 minute, ceea ce conduce pete în celule în mod corespunzător.
- Apoi se adaugă soluția de decolorare (Aceasta îndepărtează colorantul roșu din toate celulele, cu excepția bacteriilor cu aciditate rapidă).
- Albastrul de metilen este adăugat ca o contra-pată (colorează toate celulele bacteriene decolorate).
- Bacteriile rapide cu acid rămân roșii, în timp ce bacteriile rapide cu aciditate se colorează în albastru.
Care sunt asemănările dintre Gram Color și Acid Fast?
- Gram color și Acid fast sunt două tehnici de colorare diferențiale.
- Ambele tehnici clasifică bacteriile în două grupuri.
- Ambele tehnici folosesc două pete și una decolorantă.
Care este diferența dintre pata de Gram și acidul rapid?
Difuzarea articolului din mijloc înainte de tabel
Gram Stain vs Acid Fast |
|
| Colorarea Gram este o tehnică diferențială de colorare, care separă bacteriile în două grupuri de bacterii Gram-pozitive și bacterii Gram-negative. | Colorarea acidă rapidă este o colorare diferențială utilizată pentru a identifica organismele cu aciditate rapidă de la organismele rapide fără aciditate. |
| Pata primară | |
| Violetul de cristal este pata primară utilizată în mod obișnuit în colorarea cu gram. | Carbol fuchsin este pata primară utilizată în acid rapid. |
| Agent decolorant | |
| Alcoolul 95% este utilizat ca agent decolorant în pata de gram. | Alcoolul acid este utilizat ca agent de decolorare în acid rapid. |
| Counter Stain | |
| Pata Gram utilizează safranina ca contrapătare. | Pata rapidă acidă folosește albastru de metilen ca contrapătare. |
| Observare | |
| Bacteriile gram negative sunt observate în culoarea culegătoare și bacteriile grame pozitive sunt observate în culoarea violet. | Acidele bacterii rapide sunt observate în culoarea roșie și bacteriile rapide neacide sunt observate în culoarea albastră. |
Rezumat - Gram Stain vs Acid Fast
Vizualizarea microorganismelor în stare vie este dificilă. Prin urmare, petele biologice și procedurile de colorare sunt utilizate pe scară largă pentru a studia proprietățile lor. Colorarea diferențială este un tip de tehnică de colorare utilizată pentru a diferenția bacteriile. Colorarea Gram și colorarea rapidă a acidului sunt două tehnici diferențiale de colorare. Colorarea Gram diferențiază bacteriile gram negative și bacteriile gram pozitive pe baza grosimii pereților celulari. Colorarea rapidă a acidului diferențiază bacteriile rapide ale acidului de bacteriile rapide ale acidului pe baza conținutului de acid micolic din peretele celular. Aceasta este diferența dintre acidul rapid și pata de gram.
Descărcați versiunea PDF a Gram Stain vs Acid Fast
Puteți descărca versiunea PDF a acestui articol și o puteți folosi în scopuri offline, conform notei de citare. Vă rugăm să descărcați versiunea PDF aici Diferența dintre Gram Stain și Acid Fast.
