Diferența cheie - RNASE A vs RNASE H
Ribonucleazele sunt nucleaze care degradează în mod specific ARN-ul în unități mai mici. Ele pot fi împărțite în două categorii; endoribonucleaze și exoribonucleaze. Endoribonucleaza este o endonuclează care poate degrada ARN monocatenar sau dublu catenar. Clivează legăturile fosfodiester în cadrul unui lanț polinucleotidic de ARN. Exemplele sunt RNază A, RNază III, RNază T1, RNază P și RNază H. Exoribonucleaza este o exonuclează care a degradat ARN prin îndepărtarea nucleotidelor terminale din 5'end sau 3'end din molecula de ARN. Exemplele sunt RNaza R, RNaza II, RNaza D și RNaza PH. Diferența cheie între RNASE A și RNASE H este că RNase A este o ribonuclează pancreatică care degradează în mod specific ARN monocatenar în componente mai mici, în timp ce RNase H este o enzimă nespecifică care scindează ARN-ul în ARN-ADN hibrid în unități mai mici prin mecanismul hidrolitic.
CUPRINS
1. Prezentare generală și diferența cheie
2. Ce este RNASE A
3. Ce este RNASE H
4. Asemănări între RNASE A și RNASE H
5. Comparație side by side - RNASE A vs RNASE H în formă tabelară
6. Rezumat
Ce este RNASE A?
RNaza A este o ribonuclează pancreatică care clivează în mod specific resturile de citozină și uracil nepereche la capătul 3 'al ARN monocatenar. RNaza H funcționează la o concentrație mai mare de sare (0,3M sau concentrație mai mare de NaCI). Reacția hidrolitică este în două etape. Formează un produs 3 'fosforilat prin intermediar monofosfat ciclic 2', 3 '. Deși este specific ARN monocatenar la concentrație mai mare de sare, poate degrada și ARN bicatenar și ARN în hibrid ARN-ADN la concentrație mai mică de NaCl (mai mică decât 0,3M NaCl).
Bruce Merrifield a sintetizat mai întâi această enzimă. RNaza A este o enzimă foarte populară în cercetarea moleculară. RNaza A pancreatică bovină este un exemplu de RNaza A. Și este una dintre cele mai dure enzime care sunt utilizate în laborator. Această enzimă nu are nevoie de cofactor pentru activitatea sa. Este o enzimă foarte termostabilă. RNaza A este prima enzimă și a treia proteină la care a fost detectată o secvență corectă de aminoacizi. Această enzimă este foarte mică, cu 124 de aminoacizi și o masă moleculară de 12600da. Și are patru reziduuri de histidină (His 12 și His 119 care implică o reacție catalitică).
Figura 01: RNase A
RNaza A poate fi izolată prin fierberea unei probe brute. Când fierbe, toate celelalte enzime degradează RNaza A. rămasă. RNaza A este o enzimă uimitor de stabilă. Această enzimă inhibă cu proteine inhibitoare de ribonuclează, complexe de metale grele și vanadat de uridină.
Ce este RNase H?
RNaza H este o enzimă ribonuclează nespecifică care poate degrada ARN-ul în hibridul ARN-ADN prin reacție hidrolitică. RNaza H clivează legătura 3'- OP a ARN-ului într-un hibrid ARN-ADN. În cele din urmă, produce produse terminate cu fosfat 3'OH și 5 '. În replicarea ADN-ului, acesta joacă un rol esențial prin îndepărtarea primerului de ARN după ce se formează noi fire ADN. În condiții de laborator, degradează în mod specific ARN-ul în hibrid ARN-ADN, dar nu ADN și ARN nehibridizat. Și această enzimă este de obicei folosită pentru a distruge șablonul de ARN după ce se formează prima catena de ADN complementară în timpul sintezei ADNc.
Figura 02: RNase H
RNase H se folosește și în testele de protecție nuclează. Poate fi, de asemenea, încorporat la îndepărtarea cozii poli A din ARNm. RNaza H are capacitatea de a distruge ARN necodificator în interiorul și în exteriorul celulei. Ionii metalici sunt necesari ca cofactori pentru această activitate proteică. Un chelator (EDTA) poate fi utilizat pentru a inhiba enzima RNase H.
Care sunt asemănările dintre RNASE A și RNASE H?
- Ambele sunt proteine în natură.
- Ambele sunt endoribonucleaze
- Ambele pot degrada ARN-ul.
- Ambele efectuează reacții hidrolitice.
- Laboratoarele moleculare le folosesc pe ambele.
Care este diferența dintre RNASE A și RNASE H?
Difuzarea articolului din mijloc înainte de tabel
RNASE A vs RNASE H |
|
| RNaza A este o ribonuclează pancreatică care clivează în mod specific capătul 3 'al resturilor de citozină și uracil nepereche de ARN monocatenar la concentrație mai mare de sare. | RNaza H este o enzimă ribonuclează nespecifică care poate degrada ARN în hibrid ARN-ADN prin reacție hidrolitică. |
| Natura scindării ARN-ului | |
| RNaza A clivează în mod specific ARN monocatenar la o concentrație mai mare de sare. | RNaza H clivează ARN în hibrid ARN-ADN. |
| Nevoia de co-factori pentru activitate | |
| RNase A nu are nevoie de cofactori pentru activitatea sa. | RNase H are nevoie de ioni metalici ca cofactori pentru activitatea sa. |
| Inhibitori ai activității proteinelor | |
| Proteina inhibitoare a ribonucleazei, complexele de metale grele și vanadat de uridină inhibă activitatea ARNsei A. | Un chelator (EDTA) inhibă activitatea RNazei H. |
| Eliminarea ARN Primer în replicarea ADN | |
| RNaza A nu este utilizată pentru îndepărtarea primerului de ARN în replicarea ADN-ului. | RNaza H este utilizată pentru îndepărtarea primerului de ARN în replicarea ADN-ului |
| Eliminarea șablonului ADN în sinteza complementară a ADN-ului (ADN-C) | |
| RNaza A nu este utilizată pentru îndepărtarea șablonului de ARN în timpul sintezei complementare de ADN (ADN-C). | RNaza H este utilizată pentru îndepărtarea șablonului de ARN în timpul sintezei complementare a ADN-ului (ADN-C). |
| Îndepărtarea Poly-A-Tail în ARNm hibridizat la Oligo (dt) | |
| RNaza A nu este utilizată pentru a îndepărta „coada poli-A” în ARNm hibridizat la oligo (dt). | RNaza H este utilizată pentru a îndepărta „coada poli-A” în ARNm hibridizat la oligo (dt) |
Rezumat - RNASE A vs RNASE H
Ribonucleazele sunt enzime de nuclează care au capacitatea de a scinde ARN-ul în unități mai mici. Sunt două tipuri; endoribonucleaze și exoribonucleaze. Endoribonucleaza este o endonuclează care are capacitatea de a degrada ARN monocatenar sau dublu catenar. Și clivează legătura fosfodiester în cadrul unui lanț polinucleotidic de ARN. RNaza A și RNaza H sunt două endoribonucleaze. RNaza A este o ribonuclează pancreatică care clivează în mod specific resturile de citozină și uracil nepereche la capătul 3 'al ARN monocatenar la concentrație mai mare de sare. RNaza H este o enzimă ribonuclează nespecifică care poate degrada ARN în hibrid ARN-ADN prin reacție hidrolitică. Aceasta este diferența dintre RNaza A și RNaza H.
Descărcați PDF RNASE A vs RNASE H
Puteți descărca versiunea PDF a acestui articol și o puteți folosi în scopuri offline, conform notei de citare. Vă rugăm să descărcați versiunea PDF aici Diferența dintre RNASE A și RNASE H
