Diferența cheie - Polimeraza Taq vs Polimeraza ADN
ADN polimeraza este o enzimă care creează ADN nou din blocurile sale (nucleotide). La procariote și eucariote, se găsesc diferite tipuri de ADN polimeraze. Duplicarea ADN este fezabilă datorită prezenței acestor enzime speciale, iar informațiile genetice sunt transmise descendenților prin acțiunea ADN polimerazelor. Taq polimeraza este un tip special de ADN polimerază care este termostabilă și este utilizată pe scară largă în PCR. Taq polimeraza se găsește în bacteriile termofile și este purificată în replicarea ADN in vitro. Diferența cheie între Taq polimeraza și ADN polimeraza este că Taq polimeraza poate rezista la temperaturi ridicate fără denaturare, în timp ce alte ADN polimeraze se denaturează la temperaturi ridicate (la temperaturi degradante ale proteinelor).
CUPRINS
1. Prezentare generală și Diferența cheie
2. Ce este Polimerază Taq
3. Ce este DNA Polymerase
4. Side by Side Comparație - Polimerază Taq vs DNA Polymerase
5. Rezumat
Ce este Taq Polymerase?
Taq polimeraza (Taq ADN polimeraza) este o enzimă utilizată pentru sintetizarea ADN in vitro prin tehnica PCR. Este produs de bacteria termofilă numită Thermus aquaticus care trăiește în izvoarele termale și orificiile termice. Taq polimeraza este o enzimă termostabilă care nu se degradează la temperaturi ridicate. Taq polimeraza a fost purificată pentru prima dată și publicată în Chien și colab. în 1976. Tehnica PCR se efectuează cu ajutorul polimerazei Taq datorită capacității sale de a tolera temperatura ridicată și fluctuațiile de temperatură în timpul PCR. Taq polimeraza catalizează sinteza ADN-ului atunci când există primeri, nucleotide și ADN șablon monocatenar. Enzima constă dintr-o singură polipeptidă cu o greutate moleculară de aproximativ 94 kDa. Taq polimeraza își arată activitatea optimă la 80 ° C și la un interval de pH 7 - 8 cu prezența ionilor de magneziu. Are atât polimerază, cât și activitate de exonuclează. Enzima este compusă dintr-un singur lanț polipeptidic, iar gena pentru polimeraza Taq conține un conținut ridicat de G și C (67,9%).
Polimeraza termostabilă Taq permite efectuarea PCR la temperaturi ridicate, ceea ce mărește specificitatea primerilor și reduce producția de produse PCR nedorite (dimeri de primer). Taq polimeraza elimină de asemenea necesitatea adăugării de noi enzime la reacția PCR după fiecare ciclu de reacție PCR datorită capacității sale de a rezista la temperaturi ridicate. Descoperirea polimerazei Taq a permis PCR să funcționeze într-un singur tub închis într-o mașină relativ simplă. Datorită acestor proprietăți ale polimerazei Taq, PCR devine o tehnică populară de laborator efectuată în mod obișnuit în numeroase analize de biologie moleculară referitoare la analiza ADN-ului.
Taq polimeraza este utilizată pe scară largă în tehnicile biologice moleculare și este nevoie de o producție pe scară largă a polimerazei Taq. Prin urmare, folosind tehnologia ADN-ului recombinant și clonarea genelor, gena care codifica ADN polimeraza Taq a fost clonată și exprimată în Escherichia coli. Acest lucru a facilitat foarte mult producerea Taq polimerazei recombinante și a redus prețul acestei enzime pentru o utilizare adecvată.
Figura 1: Polimeraza Taq
Ce este ADN polimeraza?
ADN polimeraza este o enzimă care catalizează sinteza ADN-ului din nucleotide. Este cea mai precisă enzimă responsabilă de duplicarea genomului și transmiterea informațiilor genetice descendenților. În timpul diviziunii celulare, ADN polimeraza dublează tot ADN-ul său și transmite câte o copie fiecărei celule fiice. În 1955, Arthur Kornberg a fost descoperit ADN polimeraza în E Coli. Funcția ADN polimerazei depinde de mai multe cerințe; ADN șablon, ioni Mg +2, toate cele patru tipuri de deoxinucleotide (dATP, dTTP, dCTP și d GTP) și o scurtă secvență de ARN (primer). Sinteza ADN-ului se face în direcția de 5 'la 3' de ADN polimerază.
ADN polimerazele pot fi grupate în șapte familii diferite: A, B, C, D, X, Y și RT (transcriptază inversă). Retrovirusurile codifică pentru RT; o ADN polimerază neobișnuită care are nevoie de un șablon de ARN pentru sinteza ADN-ului. Există cinci tipuri diferite de ADN polimeraze găsite în procariote pentru roluri diferite în replicarea ADN-ului. ADN polimeraza 3 este responsabilă pentru polimerizarea noii fire de ADN. ADN polimeraza 1 este responsabilă pentru repararea și repararea ADN-ului. ADN polimerazele 2, 4 și 5 sunt responsabile pentru repararea și corectarea ADN-ului. În eucariote, există 15 tipuri distincte de ADN polimeraze. Acestea includ cinci mari familii.
Figura 2: ADN polimerază
ADN-polimerazele sunt utilizate în clonarea genelor, PCR, secvențierea ADN-ului, detectarea SNP, diagnosticarea moleculară, etc.
Care este diferența dintre polimeraza Taq și polimeraza ADN?
Difuzarea articolului din mijloc înainte de tabel
Taq Polimerază vs ADN Polimerază |
|
| Taq ADN polimeraza este o enzimă care creează ADN. Este o enzimă termostabilă care se găsește în termofili | ADN polimeraza este o enzimă care facilitează replicarea ADN și se găsește atât în organismele procariote, cât și în organismele eucariote. |
| Degradarea la temperaturi ridicate | |
| Taq polimeraza este activă la temperaturi ridicate. | ADN polimerazele se degradează la proteine care denaturează temperaturi ridicate. |
| Utilizare | |
| Acest lucru este utilizat pe scară largă în PCR | Taq polimeraza a înlocuit ADN polimeraza din coli utilizate inițial în PCR. |
Rezumat - Polimeraza Taq vs Polimeraza ADN
ADN-polimerazele sunt enzimele care sintetizează ADN-ul din deoxinucleotide (blocuri de construcție ale ADN-ului) atunci când șablonul și primerii sunt disponibili. ADN polimerazele sunt necesare pentru a dubla ADN-ul celulelor și pentru a trece în celule fiice identice în timpul diviziunii celulare. ADN polimerazele adaugă noi nucleotide la capătul 3 'al primerului și alungesc noua sinteză a catenei ADN în direcția 5' la 3 '. Taq ADN polimeraza este una dintre enzimele ADN polimerazei care este extrem de utilă în metoda de amplificare a ADN a reacției în lanț a polimerazei (PCR). ADN polimeraza E. coli 1 a fost folosită mai devreme pentru PCR, dar Taq polimeraza comercială a înlocuit-o datorită specificității sale ridicate de legare a primerului la temperaturi ridicate și producției unui randament mai mare al produsului dorit cu un produs de amplificare mai puțin nespecific. Aceasta este diferența dintre polimeraza Taq și polimeraza ADN.
