Diferența cheie - CFU vs MPN
Unitatea de formare a coloniei (CFU) și Numărul cel mai probabil (MPN) sunt două metode utilizate pentru enumerarea microorganismelor din probe. Ambii parametri sunt utilizați pentru a detecta calitatea apei și bacteriile indicatoare fecale din probele de apă. Unitatea de formare a coloniei este o măsură utilizată pentru a enumera numărul de celule bacteriene viabile sau celule fungice în volumul sau greutatea specifică a unei probe date. Unitatea standard pentru acest parametru este CFU / ml sau CFU / g. Numărul cel mai probabil este o altă unitate utilizată pentru a măsura numărul de celule bacteriene viabile dintr-o probă lichidă. Diferența cheie între CFU și MPN este că CFU se calculează din coloniile bacteriene și fungice care cresc pe o placă solidă de agar, în timp ce MPN se calculează din bacteriile viabile care cresc într-un mediu lichid.
CUPRINS
1. Prezentare generală și diferența cheie
2. Ce este CFU
3. Ce este MPN
4. Comparare side by side - CFU vs MPN în formă tabelară
5. Rezumat
Ce este CFU?
Unitatea de formare a coloniei (CFU) este un parametru care măsoară numărul de celule bacteriene sau fungice viabile dintr-o probă dată. Metoda care numără unitățile de formare a coloniilor este denumită număr de plăci standard. Coloniile viabile care apar pe plăcile de agar sunt exprimate ca CFU la 1 ml (unitate de formare a coloniilor per mililitru) a probei pentru lichide sau CFU la 1 g (unitate de formare a coloniei la un gram) din proba pentru solide.
Există două metode comune utilizate pentru a măsura CFU într-un eșantion. Sunt metoda plăcii întinse și metoda plăcii turnate. Aceste două metode sunt susținute de o tehnică numită diluare în serie. Probele diluate în serie permit obținerea unui număr numărabil de colonii pe suprafața agarului. Un volum cunoscut de probă poate fi împrăștiat pe suprafața unei plăci de agar sau amestecat cu agar și turnat pe o placă. Placa este apoi incubată și coloniile care apar sunt numărate. Numărul de colonii se referă la numărul de microorganisme din eșantionul original. Plăcile care prezintă prea multe colonii sau prea puține colonii sunt excluse de la numărare, deoarece rezultatele ar putea să nu fie statistice exacte pe acele plăci. Statistic, cea mai bună gamă este de 30 - 300 de colonii pe o placă de agar. Prin urmare, plăcile corecte ar trebui selectate pentru o enumerare corectă. Diluarea în serie se efectuează pentru funcția de mai sus.
Odată ce ați numărat numărul de colonii viabile pe plăci, CFU / ml poate fi calculat folosind următoarea ecuație.
UFC pe ml de probă originală = numărul de colonii pe o placă X factor de diluție
Factor de diluare = (1 / Diluarea plăcii)
De exemplu, dacă obțineți 149 de colonii pe placa diluției 10-4, atunci numărul de bacterii din 1 ml din proba originală poate fi calculat după cum urmează:
UFC / ml = (149) x (1/10 -4)
= 149 × 10 4 sau 1490000
= 1. 49 x 10 6
Figura 01: Unitatea de formare a coloniei
Ce este MPN?
Cel mai probabil număr este o măsură alternativă la CFU / ml. MPN estimează, de asemenea, celulele viabile dintr-o probă lichidă. Numără organismele care cresc într-o cultură lichidă și este o tehnică predominant bacteriologică. Această metodă este utilă în special pentru probele care conțin concentrații scăzute de celule bacteriene; de exemplu, lapte, apă potabilă etc. Valoarea MPN este exprimată pentru 100 ml de volum. MPN se bazează pe o metodă statistică bazată pe teoria probabilităților. Există tabele statistice concepute pentru a găsi valorile MPN la 100 ml de probă. Aceste tabele arată rezultatele la limite de încredere de 95%.
Valoarea MPN este calculată după efectuarea unei tehnici numite metoda de fermentare cu tuburi multiple. Trei seturi de tuburi care conțin un mediu de cultură adecvat sunt inoculate cu trei volume diferite de probă, cum ar fi 10 ml, 1 ml și 0,1 ml și incubate pentru creștere. După perioada de incubație, tuburile sunt punctate + (pozitiv) sau - (negativ) pentru prezența sau absența creșterii. Modelul rezultatelor pozitive și negative este apoi comparat cu un tabel MPN cu probabilități statistice pentru a estima numărul de microorganisme. Apoi, valoarea MPN este dată pentru 100 ml de probă. MPN este utilizat pe scară largă pentru a detecta bacteriile coliforme prezente în probele de apă.
Figura 02: tabel MPN
Care este diferența dintre CFU și MPN?
Difuzarea articolului din mijloc înainte de tabel
CFU vs MPN |
|
CFU este o măsură utilizată pentru a exprima numărul de colonii bacteriene sau fungice viabile dintr-o probă dată. | MPN este o măsură alternativă la CFU și măsoară numărul de celule bacteriene viabile dintr-o probă lichidă. |
Unitate | |
CFU / ml sau CFU / g | MPN / 100 ml |
Calcul | |
CFU se calculează prin numărarea numărului de colonii crescute pe plăci de agar. | MPN este calculat prin compararea modelelor pozitive și negative ale tuburilor cu tabelul statistic MPN. |
Tehnica de diluare în serie | |
Diluarea în serie se efectuează înainte de plasarea probelor pe plăci de agar. | Diluția în serie nu se efectuează în mod normal când se calculează MPN |
Metode | |
Metoda plăcii de împrăștiere și metoda plăcii de turnare sunt două tipuri de metode efectuate pentru a obține CFU. | Fermentarea cu mai multe tuburi este metoda realizată pentru a obține valoarea MPN. |
Rezumat - CFU vs MPN
Măsurarea creșterii microbiene este necesară din mai multe motive. În fabricile de procesare a alimentelor, este necesar să se măsoare nivelul și tipul de microorganisme din alimente. În industria alimentară și medicină, este necesar să se asigure că tratamentele de sterilizare sunt aplicate eficient. În stațiile de tratare a apelor uzate, este necesar să se ia în mod obișnuit numărul microbian. La optimizarea procedurii în biologia moleculară, este necesar să se măsoare numărul de colonii de pe plăci. Prin urmare, există diferite metode de enumerare și măsurare a creșterii disponibile. CFU și MPN sunt două astfel de metode care adoptă pe scară largă în diverse domenii. CFU este o măsură a numărului de colonii bacteriene și fungice viabile prezente într-o probă dată. Se calculează utilizând metoda standard de numărare a plăcilor sau metoda viabilă de numărare a plăcilor. MPN este o altă măsură care exprimă numărul de celule bacteriene prezente într-un volum dat al probei lichide. Se calculează utilizând metoda de fermentare cu mai multe tuburi și tabelul MPN. Aceasta este diferența dintre CFU și MPN.
Descărcați versiunea PDF a CFU vs MPN
Puteți descărca versiunea PDF a acestui articol și o puteți folosi în scopuri offline conform notelor de citare. Vă rugăm să descărcați versiunea PDF aici Diferența dintre CFU și MPN.