Diferența cheie - HPLC vs LCMS
Să analizăm mai întâi semnificația HPLC și LCMS înainte de a analiza diferența dintre HPLC și LCMS. Cromatografia este o tehnică de separare în analiza chimică în care constituenții probei sunt separați în timpul trecerii printr-un mediu cromatografic. De asemenea, implică interacțiunea cu eșantionul, faza staționară și faza mobilă. HPLC înseamnă cromatografie lichidă de înaltă performanță și este utilizat ca metodă de cromatografie lichidă în chimia analitică. Combinația de cromatografie lichidă și spectroscopie de masă (LCMS) a fost dezvoltată pentru analiza cantitativă a biomoleculelor selectate și este o procedură de testare foarte sensibilă, precisă și specifică comparativ cu HPLC. Aceasta este diferența cheie între HPLC și LCMC. Acest articol vă va prezenta HPLC și LCMC care se ocupă cu analiza chimică și vor discuta diferențele dintre HPLC și LCMS.
Ce este HPLC?
Cromatografia lichidă de înaltă performanță (HPLC) este o tehnică populară de separare în chimia analitică. Este utilizat în principal pentru separarea componentelor, pentru identificarea și cuantificarea fiecărui component dintr-un amestec. Mai devreme, această metodă era cunoscută sub numele de cromatografie lichidă de înaltă presiune, deoarece depindea de pompe pentru a curge un solvent lichid sub presiune cuprinzând amestecul de probă printr-o coloană ambalată cu un material adsorbant solid. Fiecare component din amestecul de probă interacționează diferit cu materialul adsorbant solid, ceea ce duce la debituri diferite pentru diferiți constituenți. Acest lucru poate duce la separarea constituenților pe măsură ce curg în coloana HPLC.
HPLC a fost utilizat pentru diverse aplicații, cum ar fi analiza nivelurilor de vitamina D în sânge, consumul ilegal de medicamente al sportivilor prin detectarea reziduurilor de droguri în urină, sortarea constituenților unei probe biologice complexe în scopuri de cercetare și analiza și fabricarea produselor farmaceutice.
Ce este LCMS?
Cromatografia lichidă - spectrometria de masă (LCMS) este o tehnică analitică care combină abilitățile de separare fizică ale cromatografiei lichide cu abilitățile de analiză de masă ale spectrometriei de masă (MS). Cromatografia lichidă este o tehnică de separare, iar spectrometria de masă este utilizată pentru a analiza raportul masă-încărcare a particulelor încărcate. Separarea fizică se realizează de obicei prin HPLC și, alternativ, prin LCMS cunoscut și sub denumirea de HPLC-MS. LCMS este o tehnică analitică dominantă care are o precizie, sensibilitate și specificitate foarte ridicate în comparație cu HPLC. Astfel, este util în multe aplicații precum scopuri de cercetare, analize medicamentoase, analize alimentare etc. LCMS este utilizat în principal pentru a separa, pentru a detecta, identifica și cuantifica proprietățile biochimice ale unei probe particulare în prezența amestecurilor chimice complexe.
Care este diferența dintre HPLC și LCMC?
Acronim și definiție pentru HPLC și LCMC
HPLC: HPLC înseamnă cromatografie lichidă de înaltă performanță. Este o tehnică de separare utilizată în principal pentru separarea componentelor, pentru identificarea și cuantificarea fiecărui component dintr-un amestec.
LCMS: LCMS înseamnă Liquid Chromatography și Spectrometry de masă. Este o tehnică analitică care combină abilitățile de separare fizică ale cromatografiei lichide cu abilitățile de analiză de masă ale spectrometriei de masă (MS).
Caracteristicile HPLC și LCMC
Clasificare
HPLC: Aceasta este doar o metodă de cromatografie lichidă.
LCMS: Aceasta este o combinație a metodei de cromatografie lichidă și a metodei de spectrometrie de masă.
Eficienţă
HPLC: Comparativ cu LCMS, analiza HPLC este mai puțin eficientă și mai lentă.
LCMS: Comparativ cu HPLC, analiza LCMS este eficientă și mai rapidă.
Sensibilitate
HPLC: Comparativ cu LCMS, analiza HPLC este mai puțin sensibilă.
LCMS: Comparativ cu HPLC, analiza LCMS este mai sensibilă.
Specificitate
HPLC: Comparativ cu LCMS, analiza HPLC este mai puțin specifică.
LCMS: Comparativ cu HPLC, analiza LCMS este mai specifică.
Precizie
HPLC: HPLC oferă rezultate mai puțin precise decât LCMS pentru determinarea unor substanțe chimice.
LCMS: LCMS oferă rezultate mai precise decât HPLC pentru determinarea unor substanțe chimice.
Componenta
HPLC: HPLC poate fi considerat ca o componentă a LCMS.
LCMS: LCMS nu poate fi considerat ca o componentă a HPLC.
Sursa Ion
HPLC: sursa de ioni nu există în instrumentul HPLC.
LCMS: Sursa de ioni este prezentă în instrumentul LCMS.
Aplicații
HPLC: Ionii, polimerii, moleculele organice și biomoleculele pot fi analizați utilizând HPLC.
LCMS: moleculele organice și biomoleculele pot fi analizate. Spre deosebire de HPLC, LCMS poate fi folosit pentru a examina amestecurile incomplet rezolvate.
Operațiune
HPLC: Diagrama unui instrument HPLC este prezentată în figura 1 și include de obicei un eșantionator automat, pompe și un detector. Eșantionatorul introduce amestecul de probă în faza mobilă (amestec sub presiune de solvenți precum apă, acetonitril și / sau metanol) care îl transferă în coloană. Pompele furnizează fluxul dorit și compoziția fazei mobile prin coloană. Coloana este umplută cu adsorbant, care este o particulă solidă granulată, cum ar fi silice sau polimeri. Detectorul produce un semnal proporțional cu cantitatea de prezență a constituenților probei în coloană, permițând astfel analiza cuantificabilă a constituenților probei selectați. Instrumentul HPLC este controlat, iar analiza datelor este furnizată de un microprocesor digital și de un software de utilizator.
Figura 1: Diagrama instrumentului HPLC
LCMS: Diagrama instrumentului LCMS este prezentată în figura 2. Extractul probei este introdus în coloana constând din HPLC. Această coloană reține metaboliții eșantion pe baza caracterelor fizice și metaboliți diferiți curg către spectrometrul de masă la intervale de timp diferite. Spectroscopia de masă este utilizată pentru evaluarea maselor de particule, pentru determinarea aranjamentului elementar al unei molecule și pentru clarificarea structurilor moleculelor. Cu toate acestea, eșantionul ar trebui ionizat pentru a genera molecule încărcate pentru a determina raporturile lor masă-încărcare. Prin urmare, în loc de instrumente HPLC, LCMS conține trei module suplimentare, cum ar fi sursa de fier, un analizor de masă și un detector. O sursă de ioni poate transforma proba de fază gazoasă în ioni și un analizor de masă care grupează ionii după masele lor folosind câmpuri electromagnetice. In cele din urma,un detector cuantifică valorile și furnizează date pentru fiecare ion prezent în eșantion. Tehnica LCMS poate fi utilizată atât pentru aplicații calitative cât și cantitative.
Figura 2: Diagrama instrumentului LCMS
În concluzie, HPLC este o metodă de cromatografie lichidă, în timp ce LCMS este o combinație de cromatografie lichidă și spectrometrie de masă. Ambele tehnici de analiză au caracteristici diferite, dar pot fi utilizate pentru a identifica și cuantifica compozițiile alimentare, produsele farmaceutice și alte molecule bioactive.
