Diferența cheie - HPLC vs HPTLC
Diferența cheie între HPLC și HPTLC este că HPLC permite separarea cantitativă a componentelor dintr-o probă, în timp ce HPTLC nu permite separarea cantitativă a componentelor dintr-o probă.
Cromatografia este o metodă de separare fizică care este utilizată pentru separarea și identificarea componentelor dintr-un amestec. Atât HPLC, cât și HPTLC sunt tehnici cromatografice. HPLC este cromatografie lichidă de înaltă performanță. HPTLC este o cromatografie în strat subțire de înaltă performanță.
CUPRINS
1. Prezentare generală și diferența cheie
2. Ce este HPLC
3. Ce este HPTLC
4. Comparare side by side - HPLC vs HPTLC în formă tabelară
5. Rezumat
Ce este HPLC?
HPLC este cromatografie lichidă de înaltă performanță. Este o tehnică analitică utilizată pentru separarea, identificarea și cuantificarea componentelor dintr-un amestec. În această tehnică, proba este dizolvată într-un solvent adecvat. Apoi solventul cu proba este trecut printr-o pompă cu o presiune dată. Pompa este umplută cu material adsorbant solid. Apoi, unele componente se leagă puternic de materialul absorbant, în timp ce alte componente se leagă slab. Acest lucru face ca componentele să aibă debituri diferite prin pompă. Prin urmare, componentele pot fi separate cu ușurință.
Figura 01: Un sistem HPLC
Materialul adsorbant care umple pompa este cunoscut sub numele de faza staționară. Solventul cu proba dizolvată este cunoscut sub numele de faza mobilă. Pompa utilizată în această tehnică se numește coloană. Coloana este umplută cu un material adsorbant, cel mai frecvent, particule de silice. Mărimea acestor particule poate varia de la 2-50 μm. Procesul de separare este afectat de compoziția fazei mobile și de temperatura sistemului. Interacțiunile dintre faza staționară și componenta din probă pot fi interacțiuni hidrofobe, interacțiuni dipol-dipol, legături ionice etc.
Presiunea de funcționare a HPLC este considerabil mai mare decât cea a cromatografiei lichide tradiționale. Se află în jur de 50-350 de bare. Diferența dintre cromatografia lichidă și HPLC este că în cromatografia lichidă, proba cade prin coloană sub greutate, în timp ce, în HPLC, proba este presurizată prin coloană. Mărimea coloanei și a particulelor absorbante sunt de asemenea foarte mici în comparație cu cromatografia lichidă tradițională. Cu toate acestea, rezoluția dată de tehnica HPLC este superioară.
Ce este HPTLC?
HPTLC este o cromatografie în strat subțire de înaltă performanță. Este forma avansată și automată a TLC tradițional. Această tehnică oferă o rezoluție eficientă într-o perioadă scurtă de timp. În această metodă de analiză, proba și o referință pot fi analizate în același timp, ceea ce permite compararea probei cu referința. Oferă o precizie analitică îmbunătățită decât alte tehnici cromatografice. Timpul necesar analizei este mai mic. Tehnica este o tehnică low-cost.
Figura 02: O analiză a coloranților alimentari utilizând HPTLC
Metoda HPTLC este un proces simplu, iar etapa de preparare a probei este, de asemenea, eliminată (în TLC tradițional, etapa de preparare a probei este inclusă înainte de separare. Această etapă implică curățarea și îmbogățirea). Solventul poate fi utilizat direct fără nici un pretratare, deși alte tehnici cromatografice necesită pretratări, cum ar fi degazarea, filtrarea etc.
Materialul adsorbant utilizat în HPTLC este silice cu particule foarte mici. În TLC tradițional, dimensiunea particulelor de silice este de 5-20 μm, în timp ce, în HPTLC, este de 4-8 μm. Proba se aplică pe placa HPTLC folosind un aplicator. Oferă o aplicare uniformă și sigură. Apoi plăcile sunt plasate într-o cameră având faza mobilă. Camera ar trebui să fie saturată cu vaporii fazei mobile. După procesul HPTLC, petele care s-au mutat pot fi detectate. Când detectează petele de pe placă, tehnica HPTLC folosește o regiune UV adecvată sau o cameră de iod.
Care este diferența dintre HPLC și HPTLC?
Difuzarea articolului din mijloc înainte de tabel
HPLC vs HPTLC |
|
| HPLC este cromatografie lichidă de înaltă performanță. | HPTLC este o cromatografie în strat subțire de înaltă performanță. |
| Tehnică | |
| În HPLC, faza mobilă cu solventul este trecută printr-o coloană umplută cu faza staționară. | În HPTLC, proba este reperată pe o placă TLC și este plasată într-o cameră care conține faza mobilă; apoi eșantionului i se permite să migreze în sus placa împreună cu faza mobilă. |
| Măsurare | |
| În HPLC, diferențele dintre debitele componentelor prin coloană sunt utilizate pentru a separa componentele din eșantion. | În HPTLC, diferențele dintre distanțele parcurse de fiecare componentă din probă sunt utilizate pentru a separa componentele din probă. |
| Separarea cantitativă | |
| HPLC permite separarea cantitativă a componentelor dintr-o probă. | HPTLC nu permite separarea cantitativă a componentelor dintr-o probă. |
Rezumat - HPLC vs HPTLC
HPLC și HPTLC sunt două tehnici cromatografice. Diferența cheie între HPLC și HPTLC este că HPLC permite separarea cantitativă a componentelor dintr-o probă, în timp ce HPTLC nu permite separarea cantitativă a componentelor dintr-o probă.
