Electroforeza vs Electroosmoza
Metodele de separare fizică precum filtrarea, distilarea, cromatografia pe coloană nu sunt metode ușoare atunci când vine vorba de separarea unor molecule. Electroforeza și electro-osmoza sunt alte două tehnici de separare care pot fi utilizate pentru separarea particulelor încărcate.
Ce este electroforeza?
Electroforeza este o tehnică de separare a moleculelor pe baza dimensiunilor acestora. Fundamental pentru această separare este încărcarea moleculei și capacitatea lor de a se deplasa într-un câmp electric. Aceasta este cea mai comună și principală tehnică din biologia moleculară pentru a separa moleculele, în special ADN-ul și proteinele. Acest lucru este utilizat în cea mai mare parte deoarece este relativ ușor și ieftin. Aparatul pentru electroforeză poate fi puțin complicat, iar pregătirea acestuia durează ceva timp. Dar putem face cu ușurință un aparat de electroforeză din lucrurile pe care le avem în laborator. Tehnicile de electroforeză pot varia în funcție de scopurile noastre. Putem folosi electroforeza unidimensională pentru separarea ADN-ului sau proteinei. Electroforeza bidimensională este utilizată atunci când sunt necesare probe mai rezolvate (ca în cazul amprentării digitale). Un gel este utilizat ca mediu de sprijin pentru separarea moleculelor. Acest gel poate fi preparat sub formă de foi plate sau în tuburi. Baza acestei proceduri este separarea moleculelor în funcție de rata de mișcare a acestora printr-un gel atunci când este furnizat un câmp electric. Moleculele încărcate negativ, cum ar fi ADN, tind să călătorească spre polul pozitiv din acest câmp electric, în timp ce moleculele încărcate pozitiv tind să călătorească către polul negativ. Două tipuri de geluri sunt utilizate în electroforeză ca agaroză și poliacrilamidă. Aceste două au puteri de rezolvare diferite. Gelul acționează ca o sită pentru a filtra diferitele dimensiuni ale moleculelor. Sarcinile electrostatice stabilite în gel acționează ca forță. Baza acestei proceduri este separarea moleculelor în funcție de rata de mișcare a acestora printr-un gel atunci când este furnizat un câmp electric. Moleculele încărcate negativ, cum ar fi ADN, tind să călătorească spre polul pozitiv din acest câmp electric, în timp ce moleculele încărcate pozitiv tind să călătorească către polul negativ. Două tipuri de geluri sunt utilizate în electroforeză ca agaroză și poliacrilamidă. Aceste două au puteri de rezolvare diferite. Gelul acționează ca o sită pentru a filtra diferitele dimensiuni ale moleculelor. Sarcinile electrostatice stabilite în gel acționează ca forță. Baza acestei proceduri este separarea moleculelor în funcție de rata de mișcare a acestora printr-un gel atunci când este furnizat un câmp electric. Moleculele încărcate negativ, cum ar fi ADN-ul, tind să călătorească spre polul pozitiv din acest câmp electric, în timp ce moleculele încărcate pozitiv tind să călătorească către polul negativ. Două tipuri de geluri sunt utilizate în electroforeză ca agaroză și poliacrilamidă. Aceste două au puteri de rezolvare diferite. Gelul acționează ca o sită pentru a filtra diferitele dimensiuni ale moleculelor. Sarcinile electrostatice stabilite în gel acționează ca forță. Aceste două au puteri de rezolvare diferite. Gelul acționează ca o sită pentru a filtra diferitele dimensiuni ale moleculelor. Sarcinile electrostatice stabilite în gel acționează ca forță. Aceste două au puteri de rezolvare diferite. Gelul acționează ca o sită pentru a filtra diferitele dimensiuni ale moleculelor. Sarcinile electrostatice stabilite în gel acționează ca forță.
Separarea depinde de mobilitatea ionilor.
F = fv = ZeE
V = ZeE / f
F = forța care acționează asupra unei particule
f = coeficient de frecare
V = viteza medie de migrare
Z = sarcina particulei migratoare
e = sarcină elementară
E = puterea câmpului electric
Condițiile necesare pentru electroforeză sunt relativ simple. Când se face gelul și se rulează proba, se folosește un tampon. Marcatoarele și coloranții sunt utilizați în scopul vizualizării.
Ce este Electro-osmoza?
Acesta este procesul de deplasare a unui lichid printr-un material folosind un câmp electric aplicat. Mișcarea se poate face printr-un material poros, de-a lungul unei membrane capilare, etc. Aceasta poate fi utilizată ca tehnică de separare (în special electro-osmoza capilară). Viteza lichidului este liniar proporțională cu câmpul electric aplicat. De asemenea, depinde de materialul utilizat pentru construirea canalului și de soluția utilizată. În interfață, soluția și materialul au obținut sarcini opuse și acest lucru este cunoscut ca un strat dublu electric. Când un câmp electric este aplicat soluției, stratul dublu electric se mișcă prin forța Coulomb rezultată. Acest lucru este cunoscut sub numele de fluxul electro-osmotic.
Care este diferența dintre Electroforeză și Electro-osmoza?
• În electroforeză, particulele solide (macromoleculele precum acizii nucleici sau proteinele) sunt deplasate folosind un câmp electric. Dar în electro-osmoză se mișcă un lichid.
• În electroforeză, materialul solid suport este un gel. Dar electro-osmoza poate fi un gel, membrană, capilară etc.
