Diferența cheie - Electroforeza pe gel vs SDS Pagina
Electroforeza pe gel este o tehnică care separă macromoleculele într-un câmp electric. Este o metodă comună în biologia moleculară de a separa ADN-ul, ARN-ul și proteinele de amestecuri în funcție de dimensiunile lor moleculare. Pagina SDS este un tip de electroforeză pe gel care este utilizată pentru a separa proteinele dintr-un amestec de proteine pe baza dimensiunilor lor. Electroforeza pe gel este un termen folosit pentru a se referi la tehnica normală aplicată pentru separarea ADN, ARN și proteine, în timp ce SDS Page este un tip de electroforeză pe gel. Aceasta este diferența cheie între electroforeza pe gel și pagina SDS.
CUPRINS
1. Prezentare generală și diferența cheie
2. Ce este electroforeza pe gel
3. Ce este SDS Pagina
4. Compararea alăturată - Electroforeza pe gel vs SDS Pagina
5. Rezumat
Ce este electroforeza pe gel?
Electroforeza pe gel este o tehnică obișnuită utilizată în laboratoare pentru separarea moleculelor încărcate, cum ar fi ADN, ARN, proteine etc. din amestecurile lor. Un gel este utilizat în electroforeza pe gel. Acționează ca o sită moleculară. Există două tipuri de geluri utilizate în electroforeza pe gel și anume agaroză și poliacrilamidă. Selectarea unui gel și a unui preparat de gel sunt factori importanți care trebuie luați în considerare în electroforeze pe gel, deoarece dimensiunea porilor gelului trebuie manipulată cu atenție pentru o bună separare a moleculelor prin electroforeză pe gel. Electroforeza pe gel are un câmp electric conectat la cele două capete ale gelului. Un capăt al gelului prezintă o încărcare pozitivă, în timp ce celălalt capăt este încărcat negativ.
ADN-ul și ARN-ul sunt molecule încărcate negativ. Odată ce sunt încărcate în gel de la capătul negativ al gelului și aplicate pe câmpul electric, ele migrează prin porii gelului spre capătul încărcat pozitiv al gelului. Viteza de migrare depinde de încărcarea și dimensiunea moleculei. Moleculele mai mici migrează ușor prin porii gelului decât moleculele mai mari. Prin urmare, moleculele mai mici parcurg o distanță mare prin gel, iar moleculele mai mari parcurg o distanță scurtă. Pentru a observa deplasarea moleculelor pe gel, se folosesc tipuri speciale de coloranți. Câmpul electric este aplicat pentru o anumită perioadă de timp și oprit pentru a preveni pierderea moleculelor și pentru a menține moleculele în pozițiile lor de deplasare. Diferite benzi pot fi observate în gel. Aceste benzi reprezintă molecule de diferite dimensiuni. Prin urmare,electroforeza pe gel este utilă pentru a diferenția moleculele în funcție de dimensiunile lor.
Electroforeza pe gel este încorporată în diverse tehnici ca tehnică pregătitoare în biologia moleculară, cum ar fi PCR, RFLP, clonarea, secvențierea ADN-ului, blotarea sudică, cartografierea genomului etc.
Figura 01: Electroforeză pe gel de agaroză
Ce este pagina SDS?
Electroforeza pe gel de poliacrilamidă cu dodecil sulfat de sodiu (pagina SDS) este un tip de electroforeză pe gel utilizat pentru separarea proteinelor. Când electroforeza pe gel este utilizată pentru separarea proteinelor, sunt necesare tratamente speciale, deoarece proteinele nu sunt încărcate negativ, cum ar fi ADN-ul și ARN-ul și nu migrează spre capătul pozitiv sau capătul negativ. Prin urmare, proteinele sunt denaturate și acoperite cu o sarcină negativă înainte de electroforeza pe gel. Se face folosind un detergent numit dodecil sulfat de sodiu (SDS). Electroforeza pe gel care folosește SDS și un gel de poliacrilamidă pentru mediul de susținere este cunoscută sub numele de SDS Page. Această tehnică este frecvent utilizată în biochimie, genetică, criminalistică și biologie moleculară.
În timpul paginii SDS, proteinele sunt amestecate cu SDS. SDS desfășoară proteinele într-o formă liniară și le acoperă cu o sarcină negativă proporțională cu masa lor moleculară. Datorită sarcinii negative, moleculele de proteine migrează spre capătul sarcinii pozitive ale gelului și se separă în funcție de masele lor moleculare. În pagina SDS, poliacrilamida este utilizată ca suport solid pentru gel. Separarea efectivă a proteinelor depinde în principal de proprietățile gelului. Prin urmare, prepararea gelului de poliacrilamidă trebuie făcută cu atenție și trebuie utilizate concentrațiile corecte de poliacrilamidă. Gelurile de poliacrilamidă prezintă rezoluție ridicată decât gelurile de agaroză. Prin urmare, pagina SDS este considerată o tehnică de înaltă rezoluție pentru separarea proteinelor.
Pagina SDS este un tip de electroforeză pe gel denaturant. Are o limitare majoră în analiza proteinelor. Deoarece SDS denaturează proteinele înainte de separare, nu permite detectarea activității enzimatice, a interacțiunilor de legare a proteinelor, a cofactorilor de proteine etc.
Figura 02: pagina SDS
Care este diferența dintre electroforeza pe gel și pagina SDS?
Electroforeza pe gel vs SDS Pagina |
|
| Electroforeza pe gel este o metodă efectuată pentru separarea macromoleculelor folosind un câmp electric. | Pagina SDS este o tehnică de electroforeză pe gel de înaltă rezoluție utilizată pentru separarea proteinelor pe baza masei lor. |
| Gel Run | |
| Poate fi realizat în mod orizontal sau vertical. | Pagina SDS rulează întotdeauna pe verticală. |
| Bază pentru separare | |
| Separarea are loc în funcție de încărcare și dimensiune. | Separarea proteinelor are loc în funcție de masă și sarcină. |
| Rezoluţie | |
| Electroforeza pe gel de agaroză are o rezoluție scăzută, iar electroforeza pe gel de poliacrilamidă are o rezoluție mai mare | Pagina SDS are o rezoluție mai bună. |
| Denaturare | |
| Electroforeza pe gel include atât tehnici de denaturare, cât și tehnici de denaturare. | Pagina SDS denaturează proteinele înainte de separare. |
Rezumat - Electroforeza pe gel vs Pagina SDS
Electroforeza pe gel este o tehnică comună utilizată pentru separarea și analiza ADN-ului, ARN-ului și proteinelor pe baza mărimii și încărcăturii lor. Există două tipuri principale de electroforeză pe gel și anume electroforeza pe gel de agaroză și electroforeza pe gel de poliacrilamidă. Gelurile de agaroză sunt utilizate în principal pentru separarea acidului nucleic; când este necesară o rezoluție mai mare, se folosesc geluri de poliacrilamidă. Pagina SDS este un tip de electroforeză pe gel utilizat în mod obișnuit pentru a separa amestecurile complexe de proteine. Este considerată o tehnică de separare a proteinelor de înaltă rezoluție. Aceasta este diferența dintre electroforeza pe gel și SDS Page.
